來源:中國標準物質網
熒光是物質吸收電磁輻射后受到激發,受激發原子或分子在去激發過程中再發射波長與激發輻射波長相同或不同的輻射。當激發光源停止輻照試樣以后,再發射過程立刻停止,這種再發射的光稱為熒光。
除了紫外光和可見光可能激發熒光外,其他的光如紅外光、X射線也可能激發出熒光。這里介紹的熒光,是指物質在吸收紫外光和可見光后發出的波長較長的紫外熒光或可見熒光。
熒光光譜具有高靈敏度,因為:
(1)熒光輻射的波比激發光波長,測量到的熒光頻率與入射光的頻率不同。熒光在各個方向上都有發射,因此可以在與入射光成直角的方向上檢測,如此,熒光不受來自激發光的本底的干擾,靈敏度大大高于紫外一可見吸收光譜,測量用的樣品量很少,且測量方法簡便。
(2)熒光光譜信息量較大。熒光光譜能提供較多的參數,例如激發譜、發射譜、峰位、峰強度、熒光壽命、熒光偏振度等。熒光光譜還可以檢測一些紫外一可見吸收光譜檢測不到的時間過程。紫外和可見熒光涉及的是電子能級之間的躍遷,熒光產生包括兩個過程—吸收以及隨之而來的發射。每個過程發生的時間與躍遷頻率的倒數為同一時間量級(10一15s),但兩個過程有時間延遲,大約為10一8s,這段時間內分子處于激發態。激發態分子的壽命取決于輻射與非輻射的競爭。由于熒光有一定的壽命,因此可以檢測一些時間過程與其壽命相當的過程。例如,生色團及其環境的變化在紫外可見吸收的10一15s的過程中基本是靜止不變的,因此無法用紫外可見吸收光譜檢測,但可以用熒光光譜檢測。
熒光光譜包括激發譜和發射譜兩種。激發譜是熒光物質在不同波長的激發光作用下測得的某一波長處的熒光強度的變化情況,即不同波長激發光的相對效率;發射譜則是某一固定波長的激發光作用下熒光強度在不同波長處的分布情況,也就是熒光中不同波長光成分的相對強度。
由于激發態和基態有相似的振動能級分布,而且從基態的zui低振動能級躍遷到*電子激發態各振動能級的概率與由*電子激發態的zui低振動能級躍遷到基態各振動能級的幾率也相近,因此吸收譜與發射譜呈鏡象對稱關系。